En 1960, sa rencontre avec le grand Maurice Tillieux l’amène à collaborer aux aventures de Félix. Pendant plus de cinq ans, il réalise en solo quelque 300 pages pour des quotidiens. En 1967, pour Pilote, il produit des histoires avec Hubuc et Reiser, puis il anime les aventures de L’Agent Caméléon avec Fred. Reprise avec Turk, cette série va lui permettre d’inaugurer les premières longues années de complicité avec celui-ci.
En 1968, pour Spirou, le duo crée Archimède, puis entame en 1969 pour Tintin, les délirantes aventures de Robin Dubois. En 1972, Bob de Groot reprend les enquêtes de Clifton. Entre-temps, il abandonne le dessin pour se consacrer exclusivement à l’écriture de scénarios.
En 1975, pour Achille Talon Magazine, il lance avec Turk les désormais fameuses aventures de Léonard. Comptant dès lors comme l’un des scénaristes humoristiques les plus réputés, il relance Chlorophylle avec Dupa et Walli. Il collabore aussi épisodiquement avec Tibet (Les Peur-de-Rien), Greg et Dany.
Pour Morris, il participe en outre aux exploits de Lucky Luke et de Rantaplan.
En 1989, Bob de Groot fait par ailleurs une incursion dans le récit réaliste en scénarisant pour Francq Des Villes et des Femmes et pour Landrain Digitaline, première bande dessinée au monde réalisée entièrement par ordinateur. En 1999, il publie Doggyguard avec Rodrigue. Puis, en 2006, il crée Père Noël et Fils et, en 2007, il relance Robin Dubois, aux éditions du Lombard. Depuis, il poursuit ses séries phares, tout comme Léonard, tout en continuant d’en créer des nouvelles, telles que Le Bar des acariens.